1:建系目的,含血清方案(重复容易,成本低)结合简易单克隆法,克隆单细胞确保目的细胞,主单克隆群体增殖无影响(分出细胞在做鉴定)
2:避免外力(机械力,化学力)影响建系,国外样本库自动化研究已有案例介绍)
3:聚丙烯管进行进行细胞处理和分选,15%FBS+1640
4:可讨论最佳温度(4°C或15°C或室温)
5:低俗离心(国外临床样本库研究,没有拿到具体数据),国内经验谈,1000转(10分钟内)
6:冻存复苏:目前细工最优方案,DMSO8-10%+FBS40-90%,冻存前我司优化胰酶消化后成单个状态,比吹打成单个活率大大提升。新型冻存液有一年以上冻存复苏案例的,我们可配合免费推广。
离心机研发生产厂家,纳米磁珠分选免疫细胞研发生产厂家,路过可深入讨论,要能共享FAQ,我们可共享验证。
如流式告知型号,最佳培养基和细胞最佳浓度我们做些最佳方案推荐。
死细胞验证:低浓度碘化丙啶(PI),鉴别染料7-AAD告知厂家货号,我们统计下各厂家优略后,讨论试公布参考结果。
自动化培养需冗余试剂配合,我司建系目的,技术老师路过多多支持。
二倍体建系考虑马血请,猪血清方案的用户,高质量及稳定货源,我们试用建议做备份体系。痛点可提前讨论。预实验先行。
自动化样本库研究可讨论细节。
自动化培养转染细胞精准SOP,培养建系会容易很多,配套血替产品有以下资源,并有兴趣可讨论,我们负责全部技术层面开发,(类器官,鸡胚液已有相关产品应用了)后期建系合作胚胎类血清替代品建系合作,(鱼、鸡、猪、羊,鼠)要有胚胎类大量生产资源,研发可讨论,一种是国内该类应用备份,建系(科研先行,生产应用跟进种子库建立。
20250119
冗余试剂设计,对抗不确定性
原代部分(特别是肿瘤细胞建系)-通用培养基合作推广
验证过程,各类难养系、原代部分(特别是肿瘤细胞建系)
各类难养系:难养系验证比原方案培养预实验更好,预实验为启,满意结果为目的,在上原代应用,含血清建系为我司重点推广目的,常规培养中问题可参考我司黑点、生长慢,不成瘤等。常规实验:难转染细胞,耐药株建立,不成瘤细胞层面分析。
原代部分(特别是肿瘤细胞建系):通过PDX ,类器官首代,特别是肿瘤部分建系关难过,细工思路,先含血清基础常用办法,先得到充足细胞量,在验证无血清方案更稳妥。
细工通用培养基优势:TRANSWELL、类器官等一些两种以上细胞培养,可行方案推广与一起验证细胞培养中痛点问题。实体组织肝我司已验证完成,细节可以讨论。
免疫类细胞科研验证合作
免疫类细胞验证合作:该类细胞从样本库研究、临床研究、细胞系培养,细工都有些基础培养中一些痛点统计,常规培养参考意义强,在验证过程中冗余试剂与技术统计都会有些经验参考,包括冻存复苏统计活率更好也可用下细工方案做备份体系。
血液类离体处理细工推荐无外力影响培养,(避免机械力、钝力、化学成份干扰)通用体系常规建议培养,再通过细工简易单克隆方法,克隆目的细胞,可反复克隆,精准拿到拿到目的细胞。
转染:目前大牌很多款都可顺利转染,解决成团成片是关键点
冻存复苏:对原代免疫类研究,培养顺利,转染成功都相对容易,冻存复苏细工推荐备份方案,在样本库研究,该类系保种都有积极意义。
首代培养难点:临床检验科室,血液生化检测设备厂家有合作的科研目的,可留言告知。相关科研合作。
类器官接种模型(人源化)共培养初步统计计划:结合细胞系不成瘤模型,细工已开始从细胞培养阶段到成瘤阶段痛点统计,并给出提升细胞质量,共同合作完成相关热点痛点统计。统计后在到临床样本不成瘤参考,人源化模型建议。细胞质量提升为基础关键词统计:细胞质量一致性,避免老幼状态并存,空泡类问题,白点类问题,黑点类问题,生长慢问题,神经,胶质类,贴壁过紧,培养过程中锚着不牢(半悬半贴问题避免)成团成片解决办法等。
相关产品介绍优势
优化胰酶-细胞膜无损消化,验证简单,不怕消化过(长时间消化)在继续培养比较,单细胞研究中提升细胞质量。同类无酶产品消化时间过长,特别是无血清培养体系难关是营养耗尽后,在经长时间消化,细胞容易正片粘连成团成糊状特点,含血清方案建系也是我司极力推荐的建系先行方案原因。
增强贴壁试剂-特别是二维培养中,比传统营养辅助试剂区别,解决成团成片,在难转染系或原代,不容易成瘤细胞,耐药株化学成分干扰后更容易成团成片,膜片钳类应用膜无损优势已在统计应用中,及上述痛点应用统计优势,可详尽讨论与分享细工共享资料。
通用培养基:纯国产备份体系,欢迎老师讨论目的细胞可行性。