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不仅可以攻克细胞亚群注释难题!单细胞转录组联合膜蛋白测序还可以......(内含福利)

作者:上海伯豪生物技术有限公司 2025-06-06T00:00 (访问量:1772)

细胞功能的核心执行者最终是蛋白质分子。由于存在复杂的转录后调控机制,mRNA与对应蛋白质的表达水平往往存在差异,这意味着仅通过mRNA检测并不能准确反映细胞内实际的蛋白丰度。这种生物学特性凸显了转录组联合蛋白质数据分析的重要性。

CITE-seq技术作为单细胞多组学研究的重要突破,在传统单细胞转录组测序基础上,创新性地整合了细胞表面蛋白的同步检测功能。该技术通过特异性抗体标记系统,能够在单细胞分辨率下实现转录组与表面蛋白质组的联合解析。

 

单细胞转录组的基础上,增加单细胞膜蛋白检测的优势有哪些?

1. 单细胞转录组+膜蛋白,助力发现更精细亚群

CITE-seq技术能够在同一个细胞中同时检测mRNA和细胞表面膜蛋白的信息,提供了比传统单细胞RNA测序更丰富的数据,能够更清晰地鉴别细胞类型,甚至可以注释到罕见细胞类型和发现新的细胞亚群。 

2. 单细胞转录组+膜蛋白,更全面的细胞Marker表达解析

mRNA和蛋白的表达并不总是一致的,如PD1 mRNA表达量通常很低,而Abseq可以高水平的检测到PD1蛋白表达。单细胞多组学通过不同维度的表达分析,更全面、更利于阐明细胞marker表达机制。

t-SEN图展示CD4,δTCR,PD1在mRNA和蛋白水平的表达

 

CITE-seq一次可以测多少种膜蛋白?

在检测通量方面,CITE-seq技术理论上具备无上限的抗体检测容量,突破了流式细胞术的荧光通道限制和质谱流式的同位素标签瓶颈。然而实际应用中,考虑到抗体交叉反应、检测成本等因素,当前研究多采用蛋白检测组合(Panel)的模式。目前已推出的单细胞CITE-seq的Panel包括:T细胞蛋白panel(30 markers),B细胞蛋白panel(30 markers),以及人免疫蛋白panel(30 markers)。此外,NK细胞蛋白panel、Tumor蛋白panel、APC蛋白panel正在陆续上市中,各panel也可相互组合,旨在助力不同专项领域单细胞研究。

1. T细胞蛋白panel(30 markers)

在免疫学研究中,T细胞作为免疫系统的核心效应细胞,其功能解析对揭示免疫应答机制及疾病诊疗具有关键作用。然而单细胞转录组分析显示,不同T细胞亚群在RNA层面的标志基因表达存在高度重叠,导致传统基于单一转录组数据的T细胞亚群注释相对困难。针对这一瓶颈,基于BD OMICS-One T panel,通过CITE-seq技术整合30种T细胞关键表面蛋白标志物的检测体系,将单细胞RNA测序与膜蛋白检测相结合,不仅能够突破单一组学的分析局限,更通过基因表达与蛋白翻译层面的协同验证,系统揭示T细胞亚群异质性及其在免疫调控中的分子机制,为精准解析T细胞功能动态提供了创新性研究工具。

 T panel 30 Markers list:

基于T panel的30个Markers解析T细胞亚群及活化状态:

2. B细胞蛋白panel(30 markers)

在B细胞发育研究中,不同发育阶段的B细胞呈现独特的表面受体和胞内信号分子表达谱。B细胞表面有多种膜表面蛋白,籍以识别抗原、与免疫细胞和免疫分子相互作用,也是分离和鉴别B细胞的重要依据。BD OMICS-One B panel整合30种B细胞特征性膜蛋白标志物,通过CITE-seq技术可创新性地建立单细胞转录组与表面蛋白组的多模态分析策略,同时捕获RNA与细胞表面膜蛋白,不仅实现B细胞亚群的高分辨率分型,更能动态追踪其活化/抑制状态转换中的调控枢纽基因,助力B细胞发育研究。

 B panel 30 Markers list:

基于B panel的30个Markers解析B细胞亚群

3. 人免疫蛋白panel(30 markers)

Immune Panel 30 Markers list:

人免疫蛋白panel集合了30种针对人主要特异性免疫标志物的抗体,每个抗体所标记的表面蛋白与相应的免疫细胞亚群高度匹配。单细胞蛋白组学的应用有助于发现精细亚群、功能靶标、特征Marker,也有助于连接单细胞和流式的联用。

单细胞转录组联合膜蛋白数据对细胞聚类分群更有优势:

 

 

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